ROL DE FACTORES DE CRECIMIENTO TRANSFORMANTE BETA EN EL MANTENIMIENTO DE LAS FUNCIONES EPITELIALES DEL OVIDUCTO

Pablo A. Valdecantos (Dir.), Eugenia Mariela Roldán Olarte, Daniela Celeste García, Elina Vanesa García, Antonio Daniel Barrera, Milagros Peña. Instituto de Biología “Dr. Francisco D. Barbieri”, Facultad de Bioquímica, Química y Farmacia, Universidad Nacional de Tucumán.

El oviducto de los mamíferos es el órgano del aparato reproductor femenino que participa en el transporte de los gametos, capacitación de espermatozoides, fecundación y desarrollo de los embriones hasta que éstos llegan al útero; por esto, desempeña un papel crítico en los procesos involucrados en la fertilidad femenina. Las células epiteliales que tapizan el interior del oviducto son importantes para el correcto funcionamiento de este órgano ya que sintetizan y secretan una variedad de macromoléculas al lumen necesarias para mantener un microambiente adecuado para las funciones del oviducto. Varios factores de crecimiento y citoquinas son producidos por las células epiteliales del oviducto; entre éstos, en nuestro laboratorio hemos estudiados ligandos y receptores de la Familia de Factores de Crecimiento Transformante β (TGF-β). Las actividades biológicas de los TGF-β son diversas, según el contexto y el tipo celular en el que actúan, desempeñando un papel fundamental en el mantenimiento de la integridad de órganos y tejidos. Sin embargo, poco se sabe acerca de su participación en el mantenimiento de las funciones normales del oviducto y cuando ésta es alterada por procesos patológicos. El objetivo general es conocer el rol de los TGF-β en el mantenimiento de la homeostasis del epitelio oviductal utilizando como modelo de estudio el oviducto bovino. TGF-β producidos por las células epiteliales del oviducto actuarían de manera autócrina para mantener la integridad y función del epitelio oviductal o parácrina regulando funciones de células del estroma; alteraciones en las vías de señalización de TGF-β afectarían negativamente la función oviductal. Estudiaremos la función de dos ligandos de la familia de TGF-β (TGFβ1 y BMP7) producidos por las células epiteliales del oviducto y con conocida participación en procesos relacionados con la remodelación y homeostasis de tejidos y órganos. Estas moléculas, mediante interacción con receptores específicos y a través de la activación de vías de señalización, regularían localmente procesos biológicos relacionados con la homeostasis del epitelio del oviducto. Para estudiar las funciones de estas moléculas, hemos desarrollado un modelo de cultivo in vitro que permite conservar las características tridimensionales del tejido epitelial del oviducto. Para esto, se utilizó colágeno tipo I como material bio-compatible obtenido de tendones de colas de ratas. Se prepararon hidrogeles con propiedades similares a las del estroma del oviducto. Por otro lado, se utilizaron oviductos de vacas recientemente faenadas para obtener células epiteliales de la región del ámpula. Estas se cultivaron sobre hidrogeles de colágeno en una interfase aire-líquido durante 21 días en medio DMEM suplementado con glutamina, suero fetal bovino 10%, piruvato 0,2 mM, antibióticos y antifúngico a 38,5 °C con 5% de CO2 y 100% de humedad. El análisis de las características histológicas, ultraestructurales y moleculares de este modelo indica que las células epiteliales secretoras y ciliadas se organizan conformando un epitelio columnar simple con uniones intercelulares similares a las de oviducto in vivo, conservando la expresión de genes específicos durante 21 días de cultivo. El modelo de cultivo logrado presenta potenciales aplicaciones en tecnología de reproducción asistida y en investigación de patologías reproductivas.